一、主要内容
本项目研发出一种与常温保存精液相同受胎率和窝产仔数的低温和冷冻保存精液,针对猪精子本身对低温特别敏感特点,进行了稀释液配方、新鲜精液运输过程、稀释方法、降温方式等对猪精液低温(4℃)保存的影响的一系列研究,在此基础上,继续探讨了冷冻稀释液配方、平衡时间及冷冻工艺等诸多因素对猪精液冷冻保存的影响的相关研究。试验结果表明:(1)精液低温保存时用SGY+0.05%EDTANa2保存效果最好,精子低温保存为6~8天,第6天时,精子的活率、质膜完整率和顶体完整率分别为70.53%,71.11%,73.73%。(2)在冷冻保存精液时,使用含3.5%乳糖、4.5%甘油、0.75% OEP的LGYGO,精液用0.5 mL细管包装,平衡时间2 h,放线速度30 s,距离液氮面3 cm处熏蒸9 min,38℃水浴解冻孵育20 s,可得到较高冷冻保存效果。(3)通过中试试验,低温保温猪精液授精的AI母猪,受胎率达到83.33%,平均产仔数10.9头。由此说明改善保存液的配方和降温程序,低温和冷冻保存的精液得到与常温保存精液相似的受胎率和窝产仔数是可行的,为今后猪冷冻保存精液在实际生产中应用和推广奠定良好的基础。
二、创新点
1、新鲜精液运输方式的选择
首次提出,炎热夏季新鲜猪精液的运输保存方式,采用四层毛巾包裹后,置于放入冰袋的双层泡沫箱中,3小时内精子活率可达到70%以上,简单实用,易于推广。
2、筛选出最优低温保存稀释液配方和保温方式
通过采用不同降温方式、稀释液比例、稀释液配方等系统的研究其对精子活率、质膜完整率和顶体完整率的影响,精子有效存活时间为6天,总存活时间为8天。
3、筛选出最优的冷冻精液配方和冷冻程序
优化了普通的冷冻保存稀释液配方,在不影响精液品质的前提下,降低乳糖的添加量,仅为3.5%,节省成本且利用保存。
三、市场应用前景
目前,鉴于生产中人工输精所用的精液都是常温保存的精液,其有效保存时间一般不超过1周,而且在3~4天用完,否则因精液品质快速下降导致输精后受胎率显著降低,而使用低温保存精液可延长时间6~8天,公母比例可由原来的1:35,提高到1:100或者更多。以辽宁省为例,2016年全省的种公猪存栏数约为6万头。如果能实现冷冻精液人工输精,公母比例可提高到1:100或者更多,那么全省种公猪饲养量可降到2万头以下,甚至能降到1万头以下。种公猪使用年限一般为3年,一头种公猪1年的成本费为6600元(年引种费4000元+饲养管理费2600元)。如果减少4万头的种公猪饲养量,则每年可节省2.6亿元。
另外,由于种公猪饲养量大幅度减少,对种公猪的选拔更加严格,优良基因在种猪群快速扩散,可大大加快品种改良和育种进展。种公猪饲养量的大大减少,也相应地减少对环境的污染。总之,普及应用猪冷冻精液技术,其经济、社会、环境效益十分可观。